Với kinh phí đầu tư lên tới 175 triệu USD ở thời điểm ra mắt vào năm 2009, Biệt đội GI Joe chính là một trong những bộ phim đắt giá nhất của Hollywood trong năm đó, một tựa phim hành động giả tưởng mang tới cho người xem liên tiếp những cảnh quay hoành tráng đúng chất “phô diễn kỹ xảo”.
Phần này có tựa là Cuộc Chiến Mãng Xà, được cầm trịch bởi đạo diễn kiêm nhà biên kịch tài ba Stephen Sommers – người gắn liền với siêu phẩm Xác ướp Ai Cập ra mắt khán giả vào năm 1999.
Trong Biệt đội GI Joe 1: Cuộc Chiến Mãng Xà, Hai người lính đóng quân tại Kazahkstan là đại úy Duke Hauser và cộng sự của anh ta là “Ripcord”, được lệnh vận chuyển các đầu đạn đặc biệt do MARS, một nhà sản xuất vũ khí do James McCullen điều khiển. Khi họ bị tấn công bởi những tên trộm do Anastasia DeCobray, người từng có thời gian làm việc với Duke, họ được cứu bởi một đơn vị đặc nhiệm quốc tế tuyệt mật được gọi là “G.I. Joe”. Thủ lĩnh của G.I. Joe, Tướng Abernathy còn được gọi là Hawk, đang lần theo dấu vết của những tên trộm và đưa anh ta tới một tổ chức độc ác có tên “Cobra”.
Trong khi Duke và Ripcord tập luyện để gia nhập Joes, Kẻ hủy diệt McCullen đang bí mật làm việc cho Cobra và âm mưu chiếm lại các đầu đạn “Nanomite” ăn kim loại của hắn. Duke và Ripcord với sự giúp đỡ của Heavy Duty, Snake Eyes và những người còn lại của Joes, phải chứng minh rằng họ là Anh hùng Mỹ thực sự – bằng cách dừng việc phóng những đầu đạn này trước khi Cobra sử dụng chúng để chiếm thế giới.